摘要

目前存在多种糖原提取方法，要么破坏糖原空间结构，要么仅提取部分糖原，导致对糖原精细分子结构的表征存在偏差。要了解糖原结构的动态变化和糖原颗粒在细菌中的多种功能，必须以最小的降解分离糖原。在本研究中，通过糖密度梯度超离心 (SDGU-CW) 使用冷水 (CW) 沉淀，证明了一种温和的糖原分离方法。还进行了传统的三氯乙酸 (TCA) 法和氢氧化钾 (KOH) 法进行比较。一种常用的实验室菌株，大肠杆菌BL21（DE3），在本研究中用作模型生物以进行演示。使用不同方法提取糖原颗粒后，通过尺寸排阻色谱 (SEC) 分析和比较它们的结构以获取粒度分布，并通过荧光团辅助毛细管电泳 (FACE) 获取线性链长分布。分析证实，通过 SDGU-CW 提取的糖原降解最少。